实验计划书范文

　　篇一：实验计划书格式要求

　　广医生化技能大赛

　　实验设计书格式要求 (A4纸)

　　一、排版

　　1、页面设置：页边距上下左右各用2.4cm。

　　2、行距：全部采用1.5倍行距。

　　3、页码：每页下端居中，全部采用阿拉伯数字排序，如1，2，3等，不要写“第1页”或“－1－”等。

　　4、页眉：全部不加页眉。

　　二、标题

　　1、实验名称（居中、三号宋体、加粗）

　　2、参赛者资料（居中、小四宋体）：学院 年级专业 姓名 宿舍电话 手机号码 （按字母排序）

　　三、摘要

　　1、“摘要”两字用黑体加粗4号字居中，字与字之间留4个字距。摘要正文用宋体小4号字。

　　2、“关键词”三个字用黑体加粗小4号字，与摘要正文左对齐。

　　3、关键词宋体小4号字，各关键词之间空2个字距，且不加标点符号。

　　四、正文

　　（1、前言；2、实验目的；3、实验原理；4、实验设备；5、实验材料及试剂：a.试剂的配制b.材料的处理；6、实验操作步骤；7、结果及计算；8、注意事项；9、费用预算）

　　1、正文层次标题题末不加标点符号。各层次一律用阿拉伯字连续编号，如：“1”，“2.1”，“3.1.2”，一律左顶格，后空一字距写标题。一级标题从前言起编，一律用黑体加粗4号字，左顶格；二级标题用黑体加粗小4号字，左顶格；三级标题用楷体加粗小4号字，左顶格。

　　2、正文其他部分全部用宋体小4号字。

　　3、图题放图下方居中，用阿拉伯数字编号，如：图1，图号后不加任何符号，空1个字距写图题；表题放表上方居中，用阿拉伯数字编号，如：表1，表号后不加任何符号，空1个字距写表题。

　　4、文中的拉丁学名采用右斜体字母。

　　五、参考文献

　　1、“参考文献”四字用黑体加粗4号字居中，字与字之间空1个字符。

　　2、中文参考文献采用宋体小4号字，英文参考文献采用Times New Roman小4号字。

　　六、附录

　　如有附录，放在参考文献后。“附录”两字用黑体加粗4号字居中，字与字之间留4个字距。

　　检验系各位同学：

　　请于4月7日前将实验设计书，报名表（附件1）和作品信息汇总表打包发至我的邮箱，文件名为参赛作品题目+组长姓名，邮件名为生化+作品名+组长姓名， ，并于4月8日将实验设计书和报名表的纸质版交给我，谢谢。

　　篇二：实验

　　实验一 水中氟化物的测定－离子选择电极法

　　水中氟化物的含量是衡量水质的重要指标之一，生活饮用水水质限值为1.0mg/L。测定氟化物的方法有氟离子选择电极法、离了色谱法、比色法和容量滴定法，前两种方法应用普遍。本实验采用氟离子选择电极法测定游离态氟离子浓度，当水样中含有化合态(如氟硼酸盐)、络合态的氟化合物时，应预先蒸馏分离后测定。

　　一、实验目的和要求 1．掌握用离子活度计或pH计、晶体管毫伏计及氟离子选择电极测定氟化物的原理和测定方法，分析干扰测定的因素和消除方法。

　　2．复习教材第二章中的相关内容；在预习报告中列出被测原电池，简要说明测定方法原理和影响测定的因素。 二、仪器

　　1．氟离子选择电极(使用前在氟离子内冲液中充分浸泡1-2h,胶塞拔掉)。 2．饱和甘汞电极（上面的胶塞拔掉，一共两个）。

　　3．精密pH计或离子活度计、晶体管毫伏计，精确到0.1mv。 4．磁力搅拌器和塑料包裹的搅拌子。 5．容量瓶：100mL、50mL。

　　6．移液管或吸液管：10.00mL、5.00mL。

　　7．烧杯：50mL、100mL。 8、试纸。 三、试剂

　　所用水为去离子水或无氟蒸馏水。 1．氟化物标准贮备液：称取0.2210 g基准氟化钠(NaF)(预先于105～110℃烘干2 h或者于500～650℃烘干约40 min，冷却)，用水溶解后转入1000 mL容量瓶中，稀释至标线，摇匀。贮存在聚乙烯瓶中。此溶液每毫升含氟离子100 μg。

　　2．乙酸钠溶液：称取15 g乙酸钠(CH3COONa)溶于水，并稀释至100 mL。 3．盐酸溶液：2 mol/L。

　　4．总离子强度调节缓冲溶液(TISAB)：称取5.88 g二水合柠檬酸钠和8.5 g硝酸钠，加水溶解，用盐酸调节pH至5～6，转入100 mL容量瓶中，稀释至标线，摇匀。

　　5．饮用水样1，2。 四、测定步骤

　　1．仪器准备和操作

　　按照所用测量仪器和电极使用说明，首先接好线路，将各开关置于“关”的位置，开启电源开关，预热15min，调零，以后操作按要求进行。

　　2．氟化物标准溶液制备 用氟化钠标准贮备液、吸液管和100mL容量瓶制备每毫升含氟离子10μg的标准溶液。

　　3．标准曲线绘制

　　用吸液管取1.00、3.00、5.00、10.00、20.00 mL氟化物标准溶液，分别置于5只50 mL容量瓶中，加入10mL总离子强度调节缓冲溶液，用水稀释至标线，摇匀。分别移入100 mL聚乙烯杯中，放入一只塑料搅拌子，按浓度由低到高的

　　顺序，依次插入电极，连续搅拌溶液，读取搅拌状态下的稳态电位值(E)。在每次测量之前，都要用水将电极冲洗净，并用滤纸吸去水分。在半对数坐标纸上绘制E-lgcF-标准曲线，浓度标于对数分格上，最低浓度标于横坐标的起点线上。

　　4．水样测定

　　用无分度吸液管吸取适量（5ml）水样，置于50 mL容量瓶中，用乙酸钠或盐酸溶液调节至近中性，加入10mL总离子强度调节缓冲溶液，用水稀释至标线，摇匀。将其移入100 mL聚乙烯杯中，放入一只塑料搅拌子，插入电极，连续搅拌溶液，待电位稳定后，在继续搅拌下读取电位值(Ex)。在每次测量之前，都要用水充分洗涤电极，并用滤纸吸去水分。根据测得的毫伏数，由标准曲线上查得试液氟化物的浓度，再根据水样的稀释倍数计算其氟化物含量。

　　5．空白试验

　　用去离子水（5ml）代替水样，按测定样品的条件和步骤测量电位值，检验去离子水和试剂的纯度，如果测得值不能忽略，应从水样测定结果中减去该值。 五、结果处理

　　1．绘制E(mV)-lg[F-]标准曲线。

　　2．计算水样中氟化物的含量。

　　实验数据记录如下： 得：

　　分别将ΔE=-96和ΔE=-103带入标准曲线，得 水样一:lg(F-)=1.14 C(F-)=13.80 mg/L 水样二:lg(F-)=1.28 C(F-)=19.05 mg/L

　　实验二 水中铬的测定

　　废水中铬的测定常用分光光度法，是在酸性溶液中，六价铬离子与二苯碳酰二肼反应，生成紫红色化合物，其最大吸收波长为540nm，吸光度与浓度的关系符合比尔定律。如果测定总铬，需先用高锰酸钾将水样中的三价铬氧化为六价，再用本法测定。

　　一、实验目的和要求

　　1．掌握六价铬和总铬的测定方法；熟练应用分光光度计。

　　2．预习第二章第六节关于水和废水中金属化合物的测定原理和方法。 二、六价铬的测定

　　（一）仪器

　　1.分光光度计，比色皿（1cm、3cm）。 2.50mL具塞比色管，移液管，容量瓶等。 （二）试剂

　　1.（1＋1）硫酸(1体积水与1体积硫酸混合，硫酸往水中注入)。 2.（1＋1）磷酸。

　　3.铬标准贮备液：称取于120℃干燥2h的重铬酸钾（优级纯）0.2829g，用水溶解，移入1000mL容量瓶中，用水稀释至标线，摇匀。每毫升贮备液含0.100μg六价铬。

　　4.铬标准使用液：吸取5.00mL铬标准贮备液于500mL容量瓶中，用水稀释至标线，摇匀。每毫升标准使用液含1.00μg六价铬。使用当天配制。

　　5.二苯碳酰二肼溶液（显色剂）：称取二苯碳酰二肼（简称DPC，C13H14N4O）0.2g，溶于50mL丙酮中，加水稀释至100mL，摇匀，贮于棕色瓶内，置于冰箱中保存，颜色变深后不能再用。

　　（三）测定步骤

　　1.标准曲线的绘制：取9支50mL比色管，依次加入0、0.20、0.50、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00和10.00mL铬标准使用液，用水稀释至标线，加入（1＋1）硫酸0.5mL和（1＋1）磷酸0.5mL，摇匀。加入2mL显色剂溶液，摇匀。5—10min后，于540nm波长处，用1cm比色皿，以水为参比，测定吸光度A并作空白校正。以吸光度为纵坐标，相应六价铬含量为横坐标绘出标准曲线。

　　2.水样的测定：取5ml（含Cr6+少于50μg）待测水样于50mL比色管中，用水稀释至标线，测定方法同标准溶液。进行空白校正后根据所测吸光度从标准曲线上查得Cr6+含量。

　　（四）数据处理

　　式中：m——从标准曲线上查得的Cr6+量（μg）；

　　V——水样的体积（mL）。

　　实验数据记录如下：

　　水样一：ΔA=0.002 带入标准曲线得Cr6+=1.104×10-3 mg/L

　　水样二：ΔA=0.003 带入标准曲线得Cr6+=2.48×10-3 mg/L

　　（五）注意事项

　　1．用于测定铬的玻璃器皿不应用重铬酸钾洗液洗涤。

　　2．Cr6+与显色剂的显色反应一般控制酸度在0.05—0.3mol/L（1/2H2SO4）范围，以0.2mol/L时显色最好。显色前，水样应调至中性。显色温度和放置时间对显色有影响，在15℃时，5—15min颜色即可稳定。

　　3．如测定清洁地面水样，显色剂可按以下方法配制：溶解0.2g二苯碳酰肼于100mL95％的乙醇中，边搅拌边加入1＋9硫酸400mL。该溶液在冰箱中可存放一个月。用此显色剂，在显色时直接加入2.5mL即可，不必再加酸。但加入显色剂后，要立即摇匀，以免Cr6+可能被乙酸还原。

　　实验三 化学需氧量的测定（高锰酸钾法）

　　在酸性条件下，高锰酸钾具有很高的氧化性，本实验采用酸性高锰酸钾法，向被测水样中定量加入高锰酸钾溶液，加热水样，水溶液中多数的有机污染物都可以氧化，加入定量且过量的草酸钠还原过量的高锰酸钾，最后再用高锰酸钾标准滴定溶液返滴过量的草酸钠至微红色为终点，由此计算出水样的耗氧量。 一、实验目的和要求

　　1．初步了解环境分析的重要性及水样的采集和保存方法

　　2．对水样中耗氧量COD与水体污染的关系有所了解 3.掌握高锰酸钾法测定水中COD的原理及方法 二、实验原理 测定时，在水样中加入硫酸及一定量的高锰酸钾，置沸水浴中加热使其中的还原性物质氧化，剩余的高锰酸钾用一定量过量的草酸钠还原，再以高鞥酸钾标准溶液返滴草酸钠过量部分。在煮沸过程中， KmnO4 和还原性物质作用：

　　4MnO4 - + 5C + 12H+ = 4Mn2+ + 5CO2 + 6H2O

　　剩余的 KmnO4 用 Na2C2O4 还原：

　　2MnO4 - + 5C2O42- + 16H+ = 2Mn2+ +10CO2 + 8H2O 再以高锰酸钾返滴草酸钠过量部分，通过实际消耗高锰酸钾的量来计算水中还原性物质的量。

　　三、主要试剂

　　0.002mol/L KmnO4 、 0.005mol/L Na2C2O4 、1:3H2SO4 四、实验步骤

　　１．0.005mol/L Na2C2O4 标准溶液的配制

　　篇三：实验计划书

　　实验计划书（初定）

　　此为初步计划书，还有很多不成熟甚至错误之处 x年xx月号 ，望老师给予指出！

　　本实验总体上分为三大步。（1）生理实验部分：本部分主要进行papaya硬度和细胞壁相关酶类活性的测定。（2）分子实验部分：本部分主要是获得papaya细胞壁相关酶类的基因序列以及由RNA差异表达谱获得细胞壁代谢酶基因等的表达特征。（3）验证实验部分：本部分主要通过实时荧光定量PCR的方法(Real time Q-PCR)验证并初步确定与“橡皮化”相关的细胞壁代谢酶基因的家族成员。

　　生理实验部分是第一步需要实施的，也是比较独立的部分，初步定为40天左右的时间结束。分子实验和验证实验部分是本实验的核心，这两部分紧密结合，需要同步进行，首先是各种样本（CK，ETH，1-MCP)的获得,随后是各样本的RNA提取，然后委托深圳华大基因公司进行转录组测序并从转录组中筛选细胞壁代谢相关的基因序列,采用5RACE及3RACE的方法,获得这些基因的全长序列以及构建差异表达谱进行相关差异基因筛选等生物信息分析，最后通过实时荧光定量PCR的方法(Real time Q-PCR)验证并初步确定与“橡皮化”相关的细胞壁代谢酶基因的家族成员。

　　一，买果。

　　二，采后预处理：

　　采后立即运回实验室，剔除病果和机械损伤果，选用形状、大小、外观颜色相对一致的番木瓜果实，剪留0.5cm长果柄为实验材料。先用1.0 g/L的次氯酸钠溶液洗果10 min，再用0.5g/L的施保功溶液浸泡果实10 min，取出晾干后备用。

　　三，样品分组（四组）：

　　1.对照组：果实用PE（聚乙烯）保鲜袋包装，轻绑袋口，置于低温（15℃）的恒温箱中贮藏。

　　2.1.0μl/L的1-MCP处理（橡皮化果实）：在室温条件下（25℃），用浓度1.0μl/L的1-MCP密闭熏蒸处理果实24 h，取出果实后用PE保鲜袋包装，轻绑袋口，置于15℃（冷藏）、RH（相对湿度）为90%的条件下贮藏。

　　3.0.5 g/L的乙烯利处理：在室温条件下（25℃），用浓度0.5 g/L的乙烯利处理果实3分钟，取出果实后用PE保鲜袋包装，轻绑袋口，置于15℃（冷藏）、RH为90%的条件下贮藏。

　　四，实验过程：

　　贮藏过程中每隔2d（催熟果实）和5d取样一次，鲜果或-70℃贮存，为以后进行基因表达水平的研究。

　　取样的同时，进行以下生理指标的测定：

　　1.果实硬度：

　　使用果实硬度计（FHM-1型,日本产）进行测定。

　　2.PG（多聚半乳糖醛酸酶）活性：

　　称取1g果肉，加入5mL(先加3 mL,后用2mL冲洗) 0.05mol/L，pH4.6的柠檬酸缓冲液低温存放（含5%NaCl和1.8 mM的EDTA（乙二胺四乙酸）），冰浴研磨匀浆。然后在10000转离心30min，将上清液进行透析，用0.05mol/L，pH4.6的柠檬酸缓冲液作为透析液，透析液不含EDTA和NaCl。透析条件：4℃条件下放24小时，中间换一次缓析液，透析完的溶液用于酶活力的测定。该操作在冰浴下进行。

　　PG活性测定：PG 活性测定以1% 多聚半乳糖醛酸 (PGA , 美国Sigma 公司) 为底物, 反应混合液为：1% PGA0.5 mL、醋酸钠缓冲液(pH 4.6)1.5 mL、酶提取液0.5 mL, 0.5 mL的水（总反应体系为3mL）, 40 ℃反应60 min, 立即加入1mLDNS (3, 5-二硝基水杨酸)终止反应。再加入沸水中煮沸10 min 后冷却，于波长540 nm 下定量分析酶水解生成的半乳糖醛酸含量。以3mL蒸馏水+1 mLDNS作为对照（CK）。以每小时释放1mg 的D-半乳糖醛酸(美国Sigma 公司) 为1 个酶活性单位（U）。以标准D-半乳糖醛酸绘制标准曲线。试验重复3 次。对照不加酶液，以缓冲液代替。

　　3.PME（果胶甲酯酶）酶活性：

　　取2g果肉，加3mL 预冷的1 mol/L NaCl 和2 g PVP（聚乙烯基吡咯烷酮）置于研钵中，充分研磨后，转移到离心管中，再用2mL NaCl润洗，倒入离心管中，于冰浴中放置1小时，每隔20 min震荡一次，在4℃下，10000转离心30 min，收集上清液，用0.01 mol/L NaOH调

　　至pH为7.5, 于4℃保存备用。测定：在试管中依次加入1.5mL 0.5% (w/v)的果胶放冰箱备用，有效期5天、0.5 mL0.01%溴麝香酚兰指示剂棕色瓶(pH为7.5)，1.0 mL水，0.5 mL酶液（酶液最后加入），总反应体系为3.5 mL 。立即将试管放入37℃的水浴锅中30 min，以蒸馏水为CK。取出试管后冷却，迅速测定其在620 nm波长一分钟内的变化。以每min变化0.01为一个活力单位（U），以U/ g.FW表示。

　　4.纤维素酶(CX)：

　　取0.625g羧甲基纤维素钠溶于0.2 mol/L（pH为4.6）的醋酸钠缓冲液中，加几滴氢氧化钠调PH值到7.0，放低温下溶解，定容至100 mL。

　　酶液的制备同PG。

　　活性测定：反应体系为1 mL CMC（羧甲基纤维素钠）溶液，酶液1 mL，醋酸钠缓冲液(pH 4.6)1.0 mL（总反应体系为3mL）,40 ℃保温60 min，取出加入3，5一二硝基水杨酸（DNS）1 mL终止反应；加入沸水中煮沸5 min，冷却后用分光光度计在540nm处比色测定吸光度值。以3mL蒸馏水+1 mLDNS作为对照（CK）。每小时由底物生产1μmol葡萄糖所需的酶量定义为一个酶活力单位（U）。

　　纤维素酶活力（U/g）=〔葡萄糖含量（mg）×酶液提取总体积（mL）×5.56〕/〔反应液中酶液加入量（mL）×样品重（g）×时间（h）〕 式中5.56——1 mg葡萄糖的微摩尔数（1000/180=5.56）；

　　用3, 5-二硝基水杨酸测定生成的葡萄糖做标准曲线。

　　5.内切木聚糖酶活性：

　　篇四：试验方案与试验计划书

　　第三章 试验方案与试验计划书

　　知识目标：

　　● 学会田间试验方案的制订方法； ● 掌握田间试验计划书的书写格式。

　　技能目标：

　　● 学会制订田间试验方案的技能； ● 学会制订田间试验计划书的技能。 第一节 制订田间试验方案方法

　　田间试验计划是试验实施的依据，更是试验成败的关键。

　　田间试验实施是把试验计划具体实施。主要包括试验地的选择、田间区划、试验材料准备、播种或移栽、田间管理、观察记载与测定、收获和测产等。

　　任何田间试验的全过程，包括选题与设计，布置与种植，管理与观察，收获与测产，以及总结与推广，所有这些工作就是田间试验的实施。要搞好田间试验，必须做好田间试验全过程的所有环节。如果试验中某一个环节没有做好，试验就会失败。因此，在田间试验实施中，必须以认真、仔细、精益求精的态度进行工作。

　　一、试验方案的设计方法

　　1．单因素试验方案

　　单因素试验方案设计一般由试验因素的若干水平加适当对照处理即可。其设计要点是确定因素的水平范围和水平间距。水平范围是指试验因素水平的上、下限范围，其大小取决于研究目的及试验研究的深入程度。水平间距是指因素相邻水平间的级差，水平间距要适当，过大没有实际意义，过小试验效果易被误差掩盖，试验结果不能说明问题。例如在育种试验中，将新育成的若干品种与原有品种进行比较以测定其改良的程度，此时，品种是试验的唯一因素，各育成品种与原有品种即为各个处理水平，在试验过程中，除品种不同外，其他环境条件和栽培管理措施都应严格控制一致。又例如为了明确某一品种的耐肥程度，施肥量就是试验因素，试验中的处理水平就是几种不同的施肥量，品种及其他栽培管理措施都相同。表3-1大豆钾肥用量试验方案即为单因素试验方案。

　　表3-1大豆钾肥施用量试验方案

　　处理号 1 2 3 4

　　处理名称 对照 低钾 中钾 高钾

　　钾肥用量（kg/hm2）

　　0 50 100 150

　　2．复因素试验方案

　　生物体生长受到许多因素的综合作用，采用复因素试验，有利于探究并明确对生物体生长有关的几个因素的效应及其相互作用，能够较全面地说明问题。复因素试验的效率常高于单因素试验。复因素试验方案设计常有两种类型，一是全面实施方案，二是不完全实施方案。

　　（1）全面实施方案 其方案设计要点是：所有试验因素在试验中处于完全平等的地位，每个因素的每个水平都与另外因素的所有水平相互配合构成试验处理组合。全面实施方案是最常用较简单的复因素试验方案，其优点是因素水平能均衡搭配。下面以大豆播期和氮肥用量二因素三水平试验方案设计为例说明，试验因素及水平见表3-2，试验方案见表3-3。

　　表3-2大豆播期、氮肥用量试验因素水平

　　试验水平

　　1 2 3

　　试验因素

　　播期 5月10日 5月20日 5月30日

　　表3-3大豆播期、氮肥用量全面实施试验方案

　　处理号 1 2 3 4 5 6 7 8 9

　　播期 5月10日 5月10日 5月10日 5月20日 5月20日 5月20日 5月30日 5月30日 5月30日

　　氮肥用量（kg/hm2）

　　50 100 150 50 100 150 50 100 150

　　氮肥用量（kg/hm2）

　　50 100 150

　　表3-3试验方案中，处理组合的确定方法是，先由播期的1水平（5月10日）分别与氮肥用量的3个水平配合，得到1、2、3三个处理组合；再由播期的2水平（5月20日）分别与氮肥用量的3个水平配合，得到4、5、6三个处理组合；最后由播期的3水平（5月30日）分别与氮肥用量的3个水平配合，得到7、8、9三个处理组合。这样就得到上述3×3全面实施试验方案。如果因素过多，试验规模很大，往往难以全面实施。

　　（2）不完全实施方案 由全面实施方案的一部分处理构成试验方案，称为不完全实施方案。不完全实施方案多采用正交设计、正交回归设计、旋转回归设计、最优设计等设计方法来制订。其设计方法可参看相关书籍。

　　制订试验计划前，要先确定田间试验课题。在选择和确定田间试验课题时，必须从生产需要出发。一般应根据农业生产发展需要提出来的研究任务、本地区生产过程要解决的问

　　题、存在着争执的生产问题及国内外其他地区的先进经验来确定试验课题。

　　二、制订试验方案原则

　　拟订一个正确有效的试验方案，要包含以下几个方面的原则：

　　1．首先应该回顾以往的研究进展，通过调查交流、文献索引等来明确试验目的，形成对所研究的主题及其外延的设想，使待拟订的试验方案能针对主题确切而有效地解决问题。

　　2．根据试验目的确定供试因素及其水平

　　供试因素一般不宜过多，应该抓住1～2个或少数几个主要因素来解决关键性问题。每个因素的水平数目也不宜过多，且各水平间距要适当，使各水平能有明确区分，并把最佳水平范围包括在内。如果涉及试验因素多，一时难以取舍，或者对各因素最佳水平的可能范围难以作出估计，这时可以将试验分为两阶段进行，即先做单因素的预备试验，通过拉大幅度进行初步观察，然后根据预备试验结果再精细选取因素和水平进行正规试验。预备试验常常采用较多的处理数，较少或不设重复；正规试验则精选因素和水平，设置较多的重复。为了不使试验规模过大而失控，试验方案原则上应力求简单。

　　3．试验方案中应包括对照

　　品种比较试验中，常常统一规定同一生态区域内使用的对照品种，以便作为各试验单位共同的比较标准。

　　4．拟订试验方案时，必须正确处理试验因素及试验条件间的关系

　　一个试验中只有供试因素的水平在变动，其他因素都保持一致，固定在某一个水平上。根据交互作用的概念，在一种条件下某试验因子的最优水平，换了一种条件，便可能不再是最优水平，反之亦然。这在品种试验中最明显。因而在拟订试验方案时必须做好试验条件的安排，绝对不要以为强调了试验条件一致性就可以获得正确的试验结果。例如品种比较试验时要安排好密度、肥料水平等一系列试验条件，使之具有代表性和典型性。由于单因素试验的试验条件必然有局限性，可以考虑将某些与试验因素可能有互作（特别负互作）的条件作为试验因素一起进行复因素试验，或者同一单因素试验在多种条件下分别进行试验。

　　第二节 田间试验计划书

　　试验课题确定后，在进行试验之前，应制订一份文字计划，叫试验计划，试验计划是试验的根据，有了试验计划，才能将试验目的、要求明确地记载下来和表达出来，试验进行才有依据，才能有条不紊地做好一切准备工作，才能使每个参加试验的人行动一致，才能使其他有关人员对试验提出宝贵的意见。因此，任何一个田间试验必须拟订试验计划，且要在试验开始前一、二个月或更早时间进行拟订。为使试验计划拟订的科学合理和参试人员都能比较深刻地理解试验目的、要求和方法。所有参试人员，都应参加拟订试验计划。计划确定后，每个参试人员都应遵守和执行计划的规定，不得私自随便更改。如果在执行中发现计划中有遗漏的地方或由于条件的变化，原计划有不适应的地方，也必须经过大家讨论后，才能修改。

　　一、拟订田间试验计划书的要求

　　拟订一个正确有效的试验计划书，应遵循以下基本要求：

　　1．目的明确

　　拟订试验计划书前应通过回顾以往研究进展，通过调查交流、文献检索等明确试验目的，形成对所研究主题及其外延的设想，使待拟订的试验方案能针对主题，确切而有效地解决问题。

　　2．处理适当

　　根据试验目的确定供试因素及其水平。供试因素一般不宜过多，应该抓住1～2个或少数几个主要因素解决关键性问题。每个因素的水平数目也不宜过多，且各水平间距要适当，使各水平能有明确区分，并把最佳水平范围包括在内。

　　3．严密的可比性

　　一般试验采用差异比较来确定试验因素的效应。为了保证试验结果的严密可比性，在设计试验方案时必须遵循如下原则：

　　（1）唯一差异原则 在试验中，除了要研究的因素设置不同的水平外，其余因素均应保持相对一致，以排除非试验因素的干扰。例如根外喷施磷肥的试验方案中如果设喷磷（A）与不喷磷（B）两个处理，则两者间差异含有磷的作用，也有水的作用，这时磷和水的作用混杂在一起解析不出来。若加入喷水（C）处理，则磷和水的作用可分别从A与C及B与C的比较中解析出来，因而可进一步明确磷和水的相对重要性。

　　（2）设置对照 农业试验中常以常规的农艺措施为比较的基准，这个比较的基准就是对照。肥料试验中，常以不施肥处理作为空白对照。品种比较试验中常统一用同一生态区域内使用的标准（对照）种，以便作为各试验单位共同的比较标准。

　　4．试验的高效性

　　复因素试验提供了比单因素试验更多的效应估计，具有单因素试验无可比拟的优越性。但当试验因素增多时，处理组合数迅速增加，要对全部处理组合进行全面试验，规模过大，往往难以实施，因而复因素试验的应用常常受到限制。

　　二、田间试验计划书的内容

　　1．试验名称、时间与地点

　　要求能反映出这一试验的主要内容，如“大豆穴播与品种分枝力关系的研究”。有时也常在课题名称中反映出这一试验的时间、负责进行的单位与地点或将时间、单位与地点写在题目下面。

　　2．试验目的、依据及预期的试验结果 试验必须有明确的目的。丰产栽培试验的主要目的是要达到一定产量指标。因此，在试验计划中应写明要达到的产量指标。如果是对比试验，就要写上进行这项试验要解决什么问题。有的试验在写试验目的时，还同时提出试验的根据，试验目前的研究成果，发展趋势及预期成果。如大豆穴播与品种分枝力关系的研究试验目的“大豆机械穴播具有高产、铲地省工、播种省籽等优点，深受广大农民欢迎，栽培面积不断扩大，已经列为黑龙江省大豆三种主要栽培模式之一。不同的播种方法由于植株密度和分布的不同，对品种性状要求便不尽相同。过去有些农业科技人员认为：穴播大豆因为种植密度小，要求植株繁茂分枝力强的品种；也有的人认为穴播大豆由于每穴植株比较集中，适合种植主秆发达，分枝力弱的品种。为了明确大豆穴播与品种分枝力的关系，才进行了这一试验，为穴播大豆进行品种选择和育种单位制定育种目标提供科学依据”。试验目的一定要写得明确，能真实地反映对试验的具体要求，使大家一看就知道这一试验为什么做，预期能达到什么结果。文字要求简明扼要，可以分条说明。

　　3．试验材料

　　写明供试土壤、供试作物和试验材料等。 4．试验处理方案

　　试验方案是全部试验工作的核心。它是根据试验目的要求，经过精密考虑，仔细讨论后被提出来的。本试验要采用几个处理，要在试验计划中写清楚，有对照处理的，要把对照处理明确写明。

　　5．试验设计方法与内容

　　包括小区面积、长宽比例、重复次数及排列方法等。据此可作出田间试验布置图。根据田间布置图，在已准备好的试验地上布置试验的各个处理小区。

　　6．整地、播种或移栽、施肥及田间管理措施

　　主要有整地方法、耕翻深度，施肥数量、种类、时期和方法，播种时期、方法和密度，灌溉次数、时期；中耕除草、防治病虫害以及其他管理等。

　　7．田间观察记载和室内考种、分析测定项目及方法。

　　8．收获计产方法

　　9．试验资料的统计方法和要求（参考第七章） 10．试验地面积、试验经费、人力及主要仪器设备

　　试验应根据勤俭的原则，在不影响完成试验的前提下，充分利用现有设备，节约各种物资材料。如果必须增添设备、人力、材料，应当将需要的名称、数量、金额等详细写在计划书上，以便早作准备如期解决，防止影响试验的顺利进行。

　　11．项目负责人、执行人

　　12．附田间试验布置图及各种记载表

　　根据田间试验方案的具体要求，结合供试验使用的土地形状及土壤肥力趋向，具体设计小区面积、长宽比例、重复次数及排列方法等，把这些要素设计绘制成图纸即成为田间试验布置图。在田间试验布置图上应根据既定的标准，按实际比例尺绘制试验区各个重复、小区、走道和保护行等内容，标明不同处理排列的位置以及试验区周围的环境状况，图上还应注明方位和边界，以便田间区划、播种管理和田间观测记载时能按图行事。试验布置图除必须考虑小区、保护行设置外，还应设置走道。一般小区相连种植，每个小区扣除边行后得实际计产面积，边行宽度多为0.5m，其试验布置图如图3-1。

　　道

　　路

　　图3-1 田间试验布置图（单位：米，比例尺1：500）

　　一份试验计划除要包括以上各项主要内容外，有时为了说明与本试验有关的基本情况，说明提出试验根据和进行本项试验的意义，还可以在试验计划开头加上一段类似序言的说明文字。有些试验所用的方法比较特殊，应在计划中加上一项试验方法。有些试验还包括一些辅助性试验，如盆栽试验、室内分析等，应在计划上列出有关项目。有些试验不只是在一个地方进行，应当在计划上列出试验地点，以及各试验点供试地段的基本情况，如地势、土壤情况、前作以及其他等。如果同一试验由几个单位、几个人共同负责，同时又有明确分工，也应当在试验计划上写明这些情况，或者在计划上加上组织领导一项。总之，为保证试验顺利进行，各项规定都应写在计划上。但也要求简明扼要，条理清晰，可写可不写的就不要写，能够用表格形式表达的，尽量采用表格。

　　三、田间试验计划书格式

　　1．封面 写明试验名称、计划书编制者或编制小组名称以及设计时间等。 2．选题依据及试验目的要求 3．试验材料和试验地条件 4．试验方法

　　篇五：实 验 计 划 书

　　实 验 计 划 书

　　题目：巴氏杆菌的分离及鉴定实验方案

　　组数：第三组

　　组长：李扬帆

　　组员：苏晓娟 王逸涵 海旭南 孙春亮 刘长宝 刘珊 陈红 刘明超 卢宁 年级：08级

　　专业：动物医学专业

　　实验目的：

　　(1)掌握多杀性巴氏杆菌分离的基本要领和方法

　　(2)掌握多杀性巴氏杆菌培养的原理和方法

　　(3)掌握有关多杀性巴氏杆菌的生化试验

　　(4)通过多杀性巴氏杆菌的分离与鉴定，掌握大肠杆菌的分离和鉴定程序，由此推广到生产实践的应用中去。

　　试剂：

　　琼脂、牛肉膏、蛋白胨、葡萄糖、乳糖、氯化钠、吲哚试剂、草酸铵结晶紫，革兰氏碘液，95%酒精，石炭酸复红，蒸馏水，生理盐水，二甲苯，香柏油，1%中性红水溶液，无菌的脱纤绵羊或家兔鲜血，靛基质试剂，3%过、胆盐、枸橼酸盐、蔗糖、酵母膏、硫代硫酸钠、0.4%酚红水溶液、磷酸氢二钾 实验器材：

　　灭菌的手术刀，镊子，刀片，玻璃皿、染液缸、接种环、试管夹、载玻片、擦镜纸、滤纸、显微镜、酒精棉、超净工作台、恒温箱、高压灭菌锅、试管、培养皿、接种针、漏斗、铁架台、玻璃棒等。

　　病料采集：

　　取巴氏杆菌致死的小鼠,腹部向上固定于蜡盘上，用酒精棉球消毒体表，打开腹腔，暴露肝脏，用剪刀在火焰烧灼灭菌，在肝脏表面烫之杀死表面杂菌，随即在灼烧部位刺一小孔，用灭菌接种环深入灼烧部位小孔中，将接种棒轻轻旋转2次，借以达到取足采料的目的。

　　涂片染色镜检：

　　美兰染色： 巴氏杆菌致死的小鼠，肝脏或脾脏触片，或心血涂片，以碱性美兰液或瑞氏染色液染色，如发现典型的两极着色的短杆菌

　　革兰氏染色：巴氏杆菌致死的小鼠，肝脏或脾脏触片，或心血涂片，革兰氏染色阴性

　　分离培养鉴定：

　　增菌培养：

　　血清肉汤培养基：在血清肉汤中培养，开始轻度浑浊，4-6d后液体变清朗，管底出现黏稠沉淀，振摇后不分散，表面形成菌环。

　　分离培养：

　　①取巴氏杆菌致死的小鼠,腹部向上固定于蜡盘上，用酒精棉球消毒体表，打开腹腔，暴露肝脏，用剪刀在火焰烧灼灭菌，在肝脏表面烫之杀死表面杂菌，随即在灼烧部位刺一小孔，用灭菌接种环深入灼烧部位小孔中，将接种棒轻轻旋转2次，借以达到取足采料的目的。

　　②在血液平板上划线培养，37℃培养24h，观察菌落形态、大小、溶血状况等。多杀性巴氏杆菌在血液平板上长成淡灰色、圆形、湿润、露珠样小菌落。 ③挑取疑似菌落4-6个：分别作以下实验

　　Ⅰ用血琼脂平板进行分离培养，血液平板上长成淡灰色、圆形、湿润、露珠样小菌落，无溶血现象, 革兰氏染色为阴性球杆菌

　　Ⅱ用麦康凯琼脂进行分离培养，麦康凯培养基上不生长

　　Ⅲ将此菌接种在三糖铁培养基上可生长，并使底部变黄。

　　④多杀性巴氏杆菌的纯培养

　　细菌生化试验：

　　（1）甲基红试验（MR试验）：

　　原理：细菌分解葡萄糖产酸，使培养液呈酸性，滴加甲基红试剂呈红色。 方法：细菌接种于葡萄糖蛋白胨水培养基

　　结果：阳性反应：呈红色 阴性反应：无变化

　　（2）吲哚试验（靛基质试验）

　　原理：细菌分解色氨酸产生靛基质，与靛基质试剂结合形成红色的化合物而呈色。 方法：细菌接种于蛋白胨水培养基，37℃培养2－3天，沿试管壁缓慢加入靛基质试剂，静置5分钟，观察结果

　　结果：阳性反应：红色环状物 阴性反应：无变化

　　（3）氧化酶试验：阳性

　　加2-3滴试剂于滤纸上，用牙签挑去一个菌落到纸上涂布，观察菌落的反应。阳性反应在5-10s内有粉红到黑色，15min后可出现假阳性反应。 用95%酒精配制的1%的

　　（4）触酶试验：阳性

　　将3%过氧化氢在载玻片上，挑菌观察有无气泡产生即可。阳性反应者有气泡，无则为阴性。

　　（5）VP试验：阴性

　　取24h的纯培养物，接种于葡萄糖蛋白胨水培养基中，置于37℃培养48-72小时，取出后在培养基中先加入VP试剂甲液0.6ml，再加入乙液0.2ml。静止在试管架上，15min后培养液呈红色者为阳性。

　　（6）糖发酵试验：

　　原理：细菌分解糖产酸使培养液呈酸性，指示剂表现呈色反应。

　　方法：细菌接种于糖发酵管内，37℃培养24小时，观察结果。结果观察：培养基为黄色者，记为+;变黄且产气泡者，记为（+）;否则记为-

　　葡萄糖发酵管，乳糖发酵管，蔗糖发酵管，果糖发酵管，麦芽糖发酵管，各两个 结果：阳性反应：从蓝紫色变为黄色 阴性法应：仍呈蓝紫色

　　（7）明胶穿刺试验：

　　取纯培养物穿刺接种至半固体琼脂培养基，穿刺线应在培养基中间，直至管底，拔出时应原路返回。结果说明：若该菌有鞭毛，能运动，则部分或全部半固体琼

　　脂变浑浊。不运动者只在穿刺线上生长。

　　（8）抑菌试验

　　取菌，用棉签用棉签致密接种于血清琼脂平板上，用无菌镊子将各种抗菌药物圆纸片，分别贴于培养基表面，各片距离要相等。37度培养24h，观察结果。 血清学鉴定

　　毒力因子检测及抗原鉴定：

　　取纯培养物用0.5%氯化钠溶液洗下制成浓菌液，并分成2份。一份经100度加热1小时（如仍有不凝集性，则在121度下处理2小时）。另一份用0.5%福尔马林37度作用24~48小时。分别用各种抗O血清和抗OK血清对上述菌液做玻板凝集实验。如该菌株含K抗原，则各种抗O血清不能使福尔马林处理的菌液凝集，但可被各种抗OK血清中的一种凝集。经100度或者121度加热的菌液可被一种抗O血清凝集，但可能与别的抗O血清发生交叉凝集，可用试管凝集法按凝集效价来排除。H抗原一般不做鉴定。

　　试验项目分配

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